BrdU 作为一种胸腺嘧啶核苷的类似物（其化学结构特点是胸腺嘧啶的碱基嘧啶环上与5位C 原子连接的甲基被溴代替），像胸腺嘧啶核苷一样可掺入到细胞合成的DNA 中。当细胞处于DNA 合成期（S 期）而同时又有BrdU 存在时, 就会有BrdU 掺入新合成的DNA 中，只要细胞不消亡，这种BrdU 就在胞核的DNA 中长期存留。
本试剂盒中的小鼠抗BrdU 单克隆抗体可以与掺入进DNA 的结合，再加入HRP 标记的羊抗小鼠，最后通过TMB 底物液显色，其显色值高低与BrdU 掺入细胞量成正比。
与其他细胞增殖检测方法相比较，本试剂盒灵敏度高、没有放射性污染，其可以检测的最低检测限度为50-100 个细胞，并且只检测新增殖细胞。
BrdU检测抗体：使用前将BrdU 检测抗体（100 x）用抗体稀释液1:100 稀释成工作液；
HRP标记羊抗小鼠：使用前按需将HRP 标记羊抗小鼠（100 x）用抗体稀释液1:100 稀释；
细胞铺板培养，每孔2500-10000 个，在37℃ 5% CO2 孵箱中培养，根据细胞类型培养相应时间（细胞密度至50-60%左右最好），在合适的时候加入加入待测试的实验组分，培养到合适的时间。
将10xBrdU（5-溴-2′-脱氧尿苷）加入培养细胞中，终浓度为1X，培养标记1-48h(根据实验试剂需求来确定最佳标记时间，同时需要设置不加入BrdU作为空白对照)。
1）丢弃细胞培养上清，每孔加入100ul 细胞固定液,室温固定30 分钟（根据细胞特点确定最佳固定时间）；
2）吸干孔里溶液，每孔加入100ul 细胞变性液,室温变性5-15分钟（根据细胞特点确定最佳固定时间）；
